بهینه سازی روشهای استخراج و تغلیظ ویروسهای روده ای از سطح سبزیجات آماده مصرف با استفاده از کلی فاژ MS2 به عنوان مدل معصومه بحرینی1، محمد باقر حبیبی نجفی2 ، محمد رضا باسامی3 ، مسعود یاورمنش2

چکیده
چکیده
ویروسهای روده ای از جمله عوامل مهم بیماریزا هستند که از طریق مواد غذایی انتقال می یابند. متاسفانه روشهای مناسبی برای نمونه برداری و بررسی ویروسها در مواد غذایی وجود ندارد. در نتیجه شناخت عوامل بیماریزای ویروسی در اپیدمیهای ایجاد شده توسط مواد غذایی با روشهای معمول بندرت انجام میشود. در این پژوهش، از کلی فاژ MS2 بعنوان یک مدل برای مطالعه روشهای استخراج و تغلیظ انترو ویروسها از سطح ماده غذایی استفاده شد. روش شستشو و استخراج کلی فاژ از سطح سبزیجات با استفاده از بافرهای مختلف شستشو بررسی گردید. از بین ده بافر استفاده شده، چهار بافر (گلایسین 05/0 مولار و کلرید سدیم 150 میلی مولار با pH 5/9، گلایسین 05/0 مولار و بیف اکسترکت 1% با pH 5/9 و بیف اکسترکت 3% با دو pH 5/7 و 5/9) دارای بیشترین میزان بازیافت در مرحله استخراج بودند (به ترتیب 82%، 88%، 92% و 82%). بعلاوه ضریب تغلیظ کلی فاژ با استفاده از پلی اتیلن گلیکول (8000) 10% و نمک کلرید سدیم 3/0 مولار نیز ارزیابی گردید. میزان تغلیظ کلی فاژ بالای 80% بود و مشخص گردید نوع بافر تاثیری بر روی میزان بازیافت ویروس در مرحله تغلیظ ندارد. بر طبق نتایج بدست آمده زمان ماندگاری ویروس در محلول پلی اتیلن گلیگول اهمیت زیادی در میزان تغلیظ داشت. بیشترین میزان تغلیظ با یک شب ماندگاری در °C4 بدست آمد.
کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله English

Optimization of extraction and concentration methods of enteric viruses from the surface of ready to Eat vegetables using MS2 coliphage as a model Bahreini, M.1 , Habibi Najafi, M. B.2; Bassami, M. R.3; Yavarmanesh, M2.

چکیده English

Enteric viruses are among those pathogens which are responsible for a significant portion of food-borne diseases. Unfortunately, robust, quantitative methods for sampling and analysis of viruses in foods are not well-established. As a result, epidemiologically determined etiologies or pathogen sources in food-borne outbreaks are rarely confirmed by routine virological analysis. In this study, MS2 coliphage was used as a model for enteric viruses. In addition, elution method of virus from the surface of vegetables by different buffers was investigated. Among ten buffers used for elution of the coliphage, four buffers (0.05 M glycin and 150mM NaCl, pH 9.5; 0.05 M glycin and 1%(w/v)beef extract, 3%(w/v)beef extract in pH 9.5 or 7.5) showed the highest coliphage recovery (82%, 88%, 92% and 82% respectively). Furthermore, the coliphage concentration index using polyethylene glycol [10%(w/v)] and NaCl (0.3M) was also evaluated. Up to 80% of the inculated of coliphages were recovered and confirmed that type of buffer had no effect on the concentration index. According to our results, incubation time in solution of polyethylene glycol was an important factor in concentration index. The highest index of concentration was detected in overnight incubation at 4°C.

کلیدواژه‌ها English

Key words: Enteric viruses
MS2 coliphage
Ready-to-eat vegetables
Elution methods