Journal of food science and technology(Iran)
مجله علوم و صنایع غذایی ایران
FSCT
Agriculture
http://fsct.modares.ac.ir
1
admin
2008-8787
2783-3534
10.22034/fsct
fa
jalali
1391
4
1
gregorian
2012
7
1
9
35
online
1
fulltext
fa
جداسازی و شناسائی باکتری اشریشیا کولا O157: H7 از نمونه های همبرگر در شهرستان مشهد با استفاده ازروش مولتی پلکس PCR
Using multiplex-PCR assay in identification of Escherichia coli O157:H7 isolated from hamburger samples in Mashhad, Iran
چکیده
تعداد یکصد نمونه همبرگر از بچ های مختلف که بصورت صنعتی تولید شده بود در فصل پاییز از سطح فروشگاههای عرضه مواد غذائی درشهرستان مشهد تهیه گردید. جهت جداسازی باکتری اشریشیا کولا O157: H7, نمونه ها ابتدا در محیط آبگوشت Trypticase soy حاوی آنتی بیوتیک نوبیوسین غنی سازی گردید. سپس در محیط آگار انتخابی سوربیتول مک کانکی حاوی سیفیکسیم و تلوریت پتاسیم کشت داده شد، از کلنی های غیر تخمیر کننده سوربیتول با آزمایشات بیوشیمیائی باکتری اشریشیا کولای مورد شناسائی قرار گرفت. سپس با روش مولتی پلکس PCR با استفاده از دو جفت پرایمر اختصاصی ژنهای سوماتیک و فلاژلار، سروتیپ O157:H7 مورد شناسائی قرار گرفت. روش مولتی پلکس PCR که در این مطالعه مورد استفاده قرار گرفت می تواند به عنوان جایگزین روشهای ایمیونولوژیک که حضور آنتی ژنهای سوماتیک و فلاژلار را مورد شناسائی قرار می دهد مطرح باشد. در این مطالعه از تعداد 9 نمونه همبرگر، کلنی های غیر تخمیر کننده سوربیتول جدا سازی گردید که در روش m-PCR در تعداد دو نمونه (2%) آلودگی به باکتری اشریشیا کولای O157:H7 مورد تایید قرار گرفت.
Abstract
In this study a number of 100 hamburger samples which were produced industerially from different batches were collected randomly from suprermarkets in Mashhad city, during the autumn months of 2006. For isolation of the bacteria, samples were, firstly enriched in modified trypticase soy broth containing novobiocin, followed by plating on sorbitol Mac Cankey agar supplemented with cifixime and potassium tellurite. Consequently the suspected non sorbitol fermenting (NSF) colonies were confirmed by biochemical tests as <em>Escherichia coli</em> and then employed for multiplex-PCR assay, using primers specific for O157 and H7 antigens gene. The m-PCR assay employed in this study may be a possible alternative to immunological assays which detects somatic and flagellar antigens. In this study, 9 NSF <em>Escherichia coli </em>colonies<em> </em>were isolated, and in multiplex-PCR assay two samples (4%) were confirmed as <em>Escherichia coli</em> O157:H7.
کلید واژه گان: اشریشیا کولا O157: H7,مولتی پلکس PCR,همبرگر
Key words: Escherichia coli O157:H7,Hamburgr,M-PCR
101
107
http://fsct.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1000-2688&slc_lang=fa&sid=7